Preguntas Frecuentes

Preguntas frecuentes sobre los medios de EmbryoCloud para la producción de embriones in vitro

1. ¿Cuáles son las ventajas de los medios de cultivo en formato seco?

Los costos de envío son más bajos porque no se requiere refrigeración durante el transporte. Los medios de cultivo en formato seco tienen una vida útil mucho más larga en comparación con sus equivalentes líquidos, permitiendo su almacenamiento durante al menos 1 año a 4°C. También pueden almacenarse a temperatura ambiente durante al menos 5 meses.

Además, la ausencia de agua hace que los medios de cultivo sean menos susceptibles a la contaminación microbiológica.

2. ¿Cómo puedo reconstituir los medios de cultivo en formato seco a su forma líquida?

EmbryoCloud proporciona la cantidad necesaria de agua ultrapura para cada medio de cultivo en formato seco. Simplemente añade la cantidad indicada de agua al vial que contiene el polvo.

3. ¿Cuánto tiempo debo esperar antes de usar el medio de cultivo después de añadir el agua ultrapura?

EmbryoCloud recomienda disolver el polvo durante al menos 6 horas a una temperatura cálida, idealmente durante la noche. Alternativamente, el polvo puede disolverse a 4ºC en el refrigerador por un mínimo de 8 horas.

4. ¿Qué debo hacer si el medio de cultivo no se ha disuelto correctamente?

EmbryoCloud recomienda agitar la solución con un vortex durante 10 segundos y asegurarse de que no queden partículas en suspensión.

5. ¿Está el medio de cultivo listo para usar una vez disuelto?

Sí, una vez reconstituido, el medio está listo para usar. Sin embargo, EmbryoCloud recomienda filtrar el medio antes de su uso con un filtro de 0,22 µm de tamaño de poro. Además, los medios de maduración, fertilización y cultivo de embriones deben ser equilibrados durante al menos 2 horas antes de su uso en una atmósfera de 5% de CO₂.

6. ¿Puedo continuar utilizando mi protocolo habitual para la producción in vitro de embriones?

Sí, absolutamente. Una vez reconstituido, el medio se puede utilizar como cualquier otro medio de cultivo líquido.

7. ¿Debo utilizar todo el volumen del medio de cultivo o puedo guardar algo para más tarde?

Utilice solo la cantidad que necesite. El medio restante se puede almacenar a 4°C, bien sellado, durante hasta 1 mes sin comprometer los resultados.

8. ¿Qué controles de calidad se realizan en los medios de cultivo en formato seco?

Cada lote de medio de cultivo se prueba para pH, osmolaridad, endotoxinas, contaminación bacteriana y fúngica. Además, se realizan ensayos embrionarios bovinos.

Se realizan ensayos embrionarios bovinos (BEA) o ensayos embrionarios porcinos (PEA). Estos consisten en la producción de embriones in vitro a partir de ovarios de matadero y semen congelado.

Los ensayos embrionarios se evalúan en función de la tasa de segmentación (porcentaje de cigotos divididos 24 horas después de la fertilización) y la tasa de blastocistos en los días 7 y 8 posteriores a la fertilización (porcentaje de blastocistos en relación con el número total de oocitos).

9. ¿Qué resultados se pueden esperar para la producción de embriones con estos medios?

En los ensayos embrionarios de EmbryoCloud utilizando ovarios de matadero y semen congelado, las tasas de segmentación superan el 70% y las tasas de blastocistos superan el 20% en el día 7 posterior a la fertilización, tanto para especies bovinas como porcinas.

Estos son nuestros umbrales de control de calidad. Sin embargo, debido a la variabilidad biológica (por ejemplo, la edad del donante, el origen de los ovarios de matadero, la calidad del semen), los resultados pueden variar, alcanzando hasta un 90% de segmentación y un 45% de tasas de blastocistos para oocitos bovinos y porcinos.

10. ¿Para qué especies animales están diseñados estos medios?

EmbryoCloud ofrece una gama completa de medios para la producción in vitro de embriones tanto en especies bovinas como porcinas.

11. ¿Los medios de cultivo contienen fluidos reproductivos?

Sí, los medios de maduración in vitro en formato seco de la línea NaturARTS incluyen fluido folicular, lo que hace que la composición de los medios de cultivo sea más similar a las condiciones fisiológicas que los embriones experimentan in vivo. Tanto en especies bovinas como porcinas, los resultados muestran una mejor producción de embriones cuando los oocitos se maduran con medios que contienen fluido folicular.

Los fluidos reproductivos se prueban para detectar varios patógenos antes de ser utilizados como suplementos en los medios, y solo se utilizan fluidos libres de virus.

Virus bovinos: IBR, BVD y lengua azul.
Virus porcinos: Circovirus tipo 2, PRRS 1, PRRS 2, parvovirus. Además, están libres de otras enfermedades de notificación obligatoria:
Bovino: Brucelosis, Tuberculosis.
Porcino: Fiebre Africana porcina, Fiebre clásica porcina.

12. ¿Existen alternativas a los medios que contienen fluidos reproductivos?

Sí, existen medios químicamente definidos para la maduración in vitro de oocitos, donde el fluido folicular es reemplazado por BSA. Sin embargo, nuestra recomendación es utilizar la línea NaturARTS para obtener los mejores resultados.

13. ¿Existen publicaciones que utilicen los medios o fluidos reproductivos de EmbryoCloud?

Sí, están disponibles en nuestro sitio web (https://embryocloud.com/) o pueden enviarse por correo electrónico.